蛍光イメージングフィルタ

励起フィルタおよび吸収フィルタは、推奨する光の伝搬方向がマウント上に矢印で示されています。

ダイクロイックフィルタはダイクロイックコーティングが施されている側に印が付いています。 コーティング面から光を入射することをお勧めします。

特長

• 蛍光イメージング用の励起フィルタ、吸収フィルタ、ダイクロイックフィルタ
• 設計波長で＞90%の透過率
• 透過帯域外でシャープなカットオフ (T< 0.001%)
• 多くの一般的な蛍光物質に対応するフィルターセット
  

  - BFP - CFP - WGFP - GFP - FITC -Alexa Fluor®∗ 488

  - YFP - tdTomato - TRITC - Texas Red®* - mCherry - Cy®†3.5

  - Cy5 - Cy5.5 - Cy7 - LI-COR IRDye®‡ 800CW

• 励起フィルタや吸収フィルタは黒アルマイト処理を施した筐体にマウント
• ダイクロイックフィルタはマウント無し
• フィルターセットは単品でお買い求めいただく場合よりも割引価格でご提供

こちらでご紹介している励起フィルタ、吸収フィルタ、ダイクロイックフィルタは、蛍光イメージング用に特別に設計されています。 業界標準のサイズなので、主要メーカのフィルターキューブにお使いいただけます。 フィルタおよびフィルターセットは一般的な蛍光色素分子(BFP、CFP、WGFP、GFP、FITC、Alexa Fluor 488、YFP、tdTomato、TRITC、Texas Red、mCherry、Cy3.5、Cy5、Cy5.5、Cy7、LI-COR IRDye 800CW)に対応するラインナップです。フィルタの多くは単体でご提供していますが、励起フィルタ、吸収フィルタ、およびダイクロイックフィルタの3枚セットでのみご提供しているフィルタもございます。詳細は「仕様」タブをご覧ください。これらのフィルタは顕微鏡用フィルターキューブに取付け済でもご用意しています。

フィルタ設計
当社のフィルタは高性能の光学仕様で、耐久性の高い設計となっています。 高精度溶融石英基板上に誘電体多層膜を蒸着して製造されています。 この基板は高品質の画像を維持するために研磨されています。 このような光学素子では、電子ビーム蒸着法で作られたものよりフィルタ層は高密度になります。高密度フィルタは、水分吸収が少ないので、フィルタの耐久性、安定性そして性能が格段に良くなります。 各フィルタ層は形成中に厚さをモニタリングしているので、設計仕様で定められた厚さからのズレが最小限に抑えられ、結果としてフィルタの全般的な性能が維持されます。

励起フィルタと吸収フィルタは、黒色アルマイト処理されたØ25 mmリングに取り付けられているため取扱いが容易で、またそれにより散乱光が制限されるため透過阻止性能(OD値)も向上します。これらのフィルタは、当社の様々なフィルターマウントやフィルターホイールに取り付けることができます。アルミニウム製リングにはネジが切られていないため、Ø25 mmフィルタを当社の内ネジ付きSM1レンズチューブに取り付ける際は、固定リングが必要になります。これらのフィルタを当社製、Olympus製、またはNikon製の蛍光顕微鏡でお使いになる場合には、ドロップイン式顕微鏡用フィルターキューブをご利用いただけます。また、マウント無しの25 mm x 36 mmダイクロイックフィルタは、キネマティックマウントKM2536に取付けることができます。このマウントは厚さ1 mmの長方形光学素子を最小の取付け負荷で固定できるように設計されています。

^∗Alexa Fluor とTexas RedはMolecular Probes社の登録商標です。
^†CyはGlobal Life Sciences Solutions Germany社の登録商標です。
^‡IRDyeはLI-COR Biotech社の登録商標です。

Item #	Kit Item #	Fluorophore	Filter Type	Center Wavelength	FWHM	Reflection Band	Transmission Band	AR Coatinga	Transmission Datab
MF390-18	MDF-BFP	BFP	Excitation	390 nm	18 nm	-	-	-
MF460-60			Emission	460 nm	60 nm	-	-	-
MD416			Dichroic	-	-	Ravg > 90% 360 - 407 nm	Tabs > 90% 425 - 575 nm	Rabs < 2% from 400 to 800 nm
MF434-17	MDF-CFP	CFP	Excitation	434 nm	17 nm	-	-	-
MF479-40			Emission	479 nm	40 nm	-	-	-
MD453			Dichroic	-	-	Ravg > 90% 423 - 445 nm	Tabs > 90% 460 - 610 nm	Rabs < 2% from 400 to 800 nm
MF445-45	MDF-WGFP	WGFP	Excitation	445 nm	45 nm	-	-	-
MF510-42			Emission	510 nm	42 nm	-	-	-
MD480			Dichroic	-	-	Ravg > 90% 415 - 470 nm	Tabs > 90% 490 - 720 nm	Rabs < 2% from 400 - 800 nm
MF469-35	MDF-GFP	GFP	Excitation	469 nm	35 nm	-	-	-
MF525-39			Emission	525 nm	39 nm	-	-	-
MD498			Dichroic	-	-	Ravg > 90% 452 - 490 nm	Tabs > 90% 505 - 800 nm	Rabs < 2% from 400 to 800 nm
MF475-35	MDF-FITC	FITC	Excitation	475 nm	35 nm	-	-	-
MF530-43			Emission	530 nm	43 nm	-	-	-
MD499			Dichroic	-	-	Ravg > 90% 470 - 490 nm	Tabs > 90% 508 - 675 nm	Rabs < 2% from 400 to 800 nm
-	MDF-GFP2	GFP Alexa Fluor® 488	Excitation	482 nm	18 nm	-	-	-
-			Emission	520 nm	28 nm	-	-	-
-			Dichroic	-	-	Ravg > 93% 350 - 488 nm	Tavg > 93% 502 - 950 nm	-
MF497-16	MDF-YFP	YFP	Excitation	497 nm	16 nm	-	-	-
MF535-22			Emission	535 nm	22 nm	-	-	-
MD515			Dichroic	-	-	Ravg > 90% 490 - 510 nm	Tabs > 90% 525 - 700 nm	-
-	MDF-TOM	tdTomato	Excitation	531 nm	40 nm	-	-	-
-			Emission	593 nm	40 nm	-	-	-
-			Dichroic	-	-	Ravg > 98% 350 - 555 nm	Tavg > 93% 569 - 950 nm	-
MF542-20	MDF-TRITC	TRITC	Excitation	542 nm	20 nm	-	-	-
MF620-52c			Emission	620 nm	52 nm	-	-	-
MD568			Dichroic	-	-	Ravg > 90% 525 - 556 nm	Tabs > 90% 580 - 650 nm	Rabs < 2% from 400 to 800 nm
MF559-34	MDF-TXRED	Texas Red®	Excitation	559 nm	34 nm	-	-	-
MF630-69			Emission	630 nm	69 nm	-	-	-
MD588d			Dichroic	-	-	Ravg > 90% 533 - 580 nm	Tabs > 90% 595 - 800 nm	Rabs < 2% from 400 to 800 nm
-	MDF-MCHC	mCherry	Excitation	562 nm	40 nm	-	-	-
-			Emission	641 nm	75 nm	-	-	-
-			Dichroic	-	-	Ravg > 98% 350 - 585 nm	Tavg > 93% 601 - 950 nm	-
MF565-24	MDF-CY3.5	Cy®3.5	Excitation	565 nm	24 nm	-	-	-
MF620-52c			Emission	620 nm	52 nm	-	-	-
MD588d			Dichroic	-	-	Ravg > 90% 533 - 580 nm	Tabs > 90% 595 - 800 nm	Rabs < 2% from 400 to 800 nm
-	MDF-MCHA	mCherry	Excitation	578 nm	21 nm	-	-	-
-			Emission	641 nm	75 nm	-	-	-
-			Dichroic	-	-	Ravg > 98% 350 - 588 nm	Tavg > 93% 603 - 950 nm	-
-	MDF-CY5	Cy5	Excitation	619 nm	60 nm	-	-	-
-			Emission	700 nm	71 nm	-	-	-
-			Dichroic	-	-	Ravg ≥ 98% 500 - 648 nm	Tavg ≥ 95% 666 - 890 nm	-
-	MDF-CY55	Cy5.5	Excitation	650 nm	44 nm	-	-	-
-			Emission	720 nm	59.5 nm	-	-	-
-			Dichroic	-	-	Ravg > 98% 520 - 674 nm	Tavg ≥ 95% 692 - 1000 nm	-
-	MDF-CY7	Cy7	Excitation	709 nm	75.5 nm	-	-	-
-			Emission	813 nm	96 nm	-	-	-
-			Dichroic	-	-	Ravg > 98% 570 - 746 nm	Tavg ≥ 95% 766 - 1100 nm	-
-	MDF-NIR	LI-COR IRDye® 800CW	Excitation	741 nm	41 nm	-	-	-
-			Emission	N/Ae	-	-	-	-
-			Dichroic	-	-	Ravg > 98% 580 - 760 nm	Tavg ≥ 95% 780 - 1100 nm	-

• 背面に入射角45°のARコーティングが施されたダイクロイックフィルタ
•   をクリックすると、プロット図やダウンロード可能なデータをご覧いただけます。
• TRITCおよびCY3.5用
• CY3.5およびTXRED用
• この吸収フィルタのカットオン波長は780 nm、790～1000 nmでの平均透過率は≥94%です。

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蛍光顕微鏡を通る光の図

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フィルターセットMDF-YFPの透過率グラフ。ダイクロイックミラー(緑色)は励起波長域(青色)内の光を反射し、蛍光波長域(赤色)の光を透過します。

蛍光顕微鏡用フィルタ

蛍光色素
蛍光色素は蛍光を生み出す分子または分子の一部です。分子が基底状態から励起状態まで移るのに必要な周波数の光を受けることで、励起が生じます。しかし、分子はいったん励起状態になると不安定になります。短い時間(通常10^-15～10^-9秒)の後、光子(フォトン)はリリースされ、分子は低い励起状態に戻ります。振動や音、熱エネルギのような多様なメカニズムによるエネルギの損失を通じて、放射光は吸収光より長い波長(低いエネルギ)になります。 

単体の蛍光色素分子はフォトブリーチングによる破壊(光励起のケミカルダメージや共有結合修飾による不可逆破壊)がなければ、連続して励起することが可能です。フォトブリーチングの前に特定の蛍光色素が受ける励起および発光サイクルの平均的な数は、蛍光色素の分子構造と局所的環境により変わります。数個の光子を放出した直後にフォトブリーチングする蛍光色素分子もあれば、ずっと強固でブリーチする前に何千あるいは何億ものサイクルを経験する蛍光色素分子もあります。

蛍光顕微鏡用フィルタ
右の実験セットアップは、励起光と蛍光の両方が顕微鏡対物レンズを通過する落射蛍光顕微鏡で使われている一般的なフィルタを示しています。用途に合わせて適切なフィルタとミラーを慎重に選ぶことによって、信号対雑音比は最大化されます。右図のように、不要な放射を最小に抑えながら蛍光信号を最大にするために3種類のフィルタが使われています。各光学素子の解説は、下に掲載されています。

励起フィルタ
励起フィルタは、蛍光色素の励起のピーク波長近傍の狭い波長範囲しか透過しません。例えば右のグラフのように、YFP励起フィルタ(MF497-16)の90%を超える透過率に対応するバンドパス領域は489～505 nmです。この範囲外の入射は一部(透過領域に近い領域で)または全部(バンドパス領域から離れた領域で)がフィルタによって阻止されます。

ダイクロイックミラー
ダイクロイックミラーは、特定の波長(カットオフ波長)よりも短い波長の光を反射しますが、それ以外の波長はすべてそのまま通過するよう設計されています。顕微鏡では、ダイクロイックミラーによって適切な波長が試料および像面に向けられます。 各ミラーに対応したカットオフ波長の値は透過の50%に対応する波長を示しています。例えば、右図に示されているように、YFPダイクロイックミラー(MD515)のカットオフ波長は約515 nmとなります。 「仕様」タブには各ダイクロイックミラーの反射率および透過率に関する情報がごらんいただけます。

ダイクロイックミラー1枚を実験セットアップで入射に対して45°に配置することにより、励起光(上図内に青色で表示)はダイクロイックミラーの表面から反射され、試料と顕微鏡対物レンズへと向かいます。一方、試料から発する蛍光(上図内に赤色で表示)はミラーを透過して検出システムへと向かいます。

ダイクロイックミラーは蛍光顕微鏡で重要な役割を果たしますが、不要な光を遮断することとなると完璧とは言えません。一般に、ダイクロイックミラーにより、カットオフ波長より短い波長の光の約90%は反射され、これより長い波長の光の約90%は透過されます。そのため、試料によって放射される(励起光より)長波長の蛍光と一緒に、励起光の一部もダイクロイックミラーを透過してしまいます。 この不要な光が検出システムに届くのを防ぐために、ダイクロイックフィルタのほかに吸収フィルタが使われます。

吸収フィルタ
吸収フィルタは不要な励起光を遮断しながら試料からの蛍光をディテクタに届ける役割を果たします。励起フィルタ同様に、このフィルタは蛍光色素の発光のピーク波長近傍の狭い帯域幅しか透過しません。例えば、右のグラフのように、YFP吸収フィルタ(MF535-22)の90%を超える透過率に対応するバンドパス領域は524～546 nmです。この範囲外の入射は一部(透過領域に近い領域で)または全部(バンドパス領域から離れた領域で)がフィルタによって阻止されます。